GJA1在结直肠癌组织中表达及促进侵袭转移的研究

摘要 目的：间隙连接Alpha-1蛋白（Gap Junction Alpha-1,GJA1）是间隙连接中分布最广泛的蛋白,并在多种肿瘤中起促癌作用,但其在结直肠癌发生、发展的作用研究甚少。本实验旨在探究GJA1在结直肠癌组织中的表达情况及其对结直肠癌细胞系侵袭、转移能力的影响,以期为结直肠癌的诊断和预后寻找新的生物标志物。方法：收集92对结直肠癌及其癌旁组织样本,提取组织RNA,利用qRT-PCR检测GJA1相对表达量,并分析GJA1表达与临床病理特征及预后的相关性。在HCT116和HCT8两种结直肠癌细胞系中分别构建GJA1过表达载体和敲减载体,利用qRT-PCR和、Western Blot检测上皮间充质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）相关蛋白E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin和Snail的表达变化,利用Wound healing和Transwell实验观察其迁移、侵袭能力的变化。结果：相对于癌旁组织,GJA1在结直肠癌组织中显著低表达。并且结直肠癌中低表达的GJA1与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴血管转移相关,低表达GJA1结直肠癌患者显示更差的总体生存率和更低的无病生存率。此外,过表达GJA1后,结直肠癌细胞E-cadherin的表达升高,N-cadherin、Vimentin和Snail的表达降低,划痕愈合减慢,Transwell转移细胞减少;而敲减GJA1后,结直肠癌细胞E-Cadherin的表达降低,N-Cadherin、Vimentin和Snail的表达升高,划痕愈合加快,Transwell转移细胞增多。结论：GJA1在结直肠癌中低表达,其表达降低可通过EMT促进结直肠癌的侵袭、转移并影响病人预后。     

不同剂量阿霉素致大鼠局灶节段硬化肾病模型的建立比较

目的探讨不同剂量阿霉素对大鼠局灶节段硬化肾病模型的影响。方法左侧肾切除加尾静脉注射不同剂量阿霉素致大鼠肾脏局灶节段性硬化,观察不同剂量阿霉素对模型大鼠成活率、24 h尿蛋白定量、血清肌酐、尿素氮、肾脏病理的影响。结果不同阿霉素注射剂量组大鼠4周、8周成活率随着注射剂量的升高呈逐渐下降趋势,且4周、8周时阿霉素注射剂量4.5～6 mg/kg组模型大鼠成活率均低于50%;8周时成活率与注射剂量呈高度显著性负相关（r=0.9045,P〈0.01）。各阿霉素注射剂量组于1周出现尿蛋白明显升高（P〈0.01）、2周出现血清肌酐明显升高（P〈0.01）、4周出现血清尿素氮明显升高（P〈0.01）,并均呈进行性增高,2周时除3 mg/kg组外,其余各组血清尿素氮较正常组高（P〈0.01,P〈0.05）;8周时各注射剂量组大鼠24 h尿蛋白定量、血清肌酐、血清尿素氮与阿霉素注射剂量呈高度显著性正相关（r=0.942 9,P〈0.01;r=0.938 4,P〈0.01;r=0.956 8,P〈0.01）。各组大鼠肾脏病理均提示肾小球出现局灶节段硬化表现,且硬化程度随注射剂量的增加而呈加重趋势。结论阿霉素尾静脉注射剂量3 mg/kg模型组大鼠死亡率低,同时大鼠肾脏病理又能表现出符合人类肾小球局灶节段硬化的改变,是较为理想的造模剂量。     

老年缺血性心力衰竭的心脏DNA甲基化编码重编程与心肌细胞焦亡、铁死亡的关联

摘要 目的：探讨老年缺血性心力衰竭的心脏DNA甲基化编码重编程与心肌细胞焦亡、铁死亡的关联性。方法：2019年12月到2021月2月,选择在本院诊治的老年缺血性心力衰竭115例作为心衰组,同期选择在本院体检的非心血管疾病老年人群115例作为对照组。检测心脏DNA甲基化编码重编程、心肌细胞焦亡、铁死亡指标表达情况并进行相关性分析。结果：心衰组的心脏DNA甲基化编码重编程指标-miR-92a、miR-130a相对表达水平高于对照组（P<0.05）。心衰组的Caspase-1蛋白、Caspase-4蛋白相对表达水平高于对照组（P<0.05）。心衰组的铁调素含量高于对照组（P<0.05）。在两组230例入选者中,Spearsman相关分析显示：缺血性心力衰竭与miR-92a、miR-130a、半胱氨酸蛋白酶1（Caspase-1）、半胱氨酸蛋白酶4（Caspase-4）、铁调素存在正向相关性（P<0.05）。Logistic回归分析显示：miR-92a、miR-130a、Caspase-1、Caspase-4、铁调素为导致缺血性心力衰竭发生的重要因素（P<0.05）。结论：老年缺血性心力衰竭患者多伴随有心脏DNA甲基化编码重编程与心肌细胞焦亡、铁死亡,后三者与缺血性心力衰竭的发生存在关联性,也是导致缺血性心力衰竭发生的重要因素。     

应用水动力转染技术使人低密度脂蛋白受体、CD81和浸入诱导蛋白L同时在小鼠体内表达

为建立人低密度脂蛋白受体（LDLR）、CD81和浸入诱导蛋白L（Sip—L）等多个HCV感染相关分子共表达的转基因小鼠,首先分别构建了白蛋白启动子调控的人LDLR、CD81和Sip-L基因的小鼠肝脏组织特异性表达载体,将3种质粒同时采用水动力转染技术导入小鼠体内,FIT—PCR和免疫组化技术检测转入体内基因的表达及持续时间。结果表明,转染8h后即可检测到3种基因在体内转录,人LDLR和CD81在转染1～4d后可在50％-90％的肝细胞中高效表达,7d后检测不到目的基因表达。为了进一步延长转染基因在小鼠体内的表达时间,又分别构建了人LDLR、CD81和Sip—L的染色体整合型表达载体,将它们与噬菌体ФC31的整合酶表达载体同时水动力转染小鼠,3种基因在体内表达时间可持续到转染后25d。以上结果表明建立了多个HCV感染相关分子共表达的转基因小鼠,为确定这些分子能否使小鼠感染HCV奠定了基础。     

蛇毒复合酶对人胃癌细胞的抑瘤研究

目的 观察蛇毒复合酶对人胃癌细胞SGC－7901的抑瘤作用及机理。方法 采用体外试验、流式细胞术和细胞形态学检查方法,观察人胃癌细胞的生长抑制率,以及细胞周期和细胞形态的变化。结果 蛇毒复合酶对人胃癌细胞有明显的抑瘤作用。24h抑瘤率达67．5％,接近5－Fu阳性对照组,并且具有明显的时效和量效关系。细胞镜检及涂片染色发现癌细胞胞膜破裂、胞质外溢、细胞坏死。流式细胞术检测蛇毒复合酶对S期细胞有明显杀伤作用,同时阻滞G0／G1期细胞进入S期。结论 蛇毒复合酶对人胃癌细胞具有一定体外抑瘤作用,其作用机理与直接破坏细胞胞膜和干扰细胞增殖周期有关。     

开放和腹腔镜直肠癌根治术患者术后早期全身与腹腔炎性反应的差异

目的:探讨开放和腹腔镜直肠癌根治术患者术后早期全身与腹腔炎性的反应。方法:选取我院直肠癌患者210例,开放直肠癌根治术为108例,腹腔镜根治术患者102例,开放直肠癌根治术组为对照组,腹腔镜根治术患者为实验组。对比手术一般指标以及术后炎症反应指标。结果:手术一般指标:对照组的切口长度、手术时间、排气时间、并发症发生率、住院时间和4天引流量均显著大于实验组,此6项差异存在统计学意义(P0.05);对照组的术中出血量、术后第1天引流量略高于实验组,此2项无统计学意义(P0.05)。炎症指标:术前2组4项炎症指标均无统计学意义(P0.05)。血液检查:术后第1天差异具有统计学意义(P0.05);术后第4天差异无统计学意义(P0.05);腹部引流物检查:第1天对照组的炎症指标均高于实验组,但差异无统计学意义(P0.05),术后第4天对照组的炎症指标均显著高于实验组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:对比于传统直肠癌开放手术,腹腔镜直肠癌根治术具有创伤小、住院时间短及恢复快等优势,同时腹腔镜手术在术后炎症消退速度更快,更有利于患者恢复。     

乳癌术后方对乳腺癌术后患者生活质量、肿瘤标志物和外周血T细胞亚群的影响

摘要 目的：观察乳癌术后方对乳腺癌术后患者生活质量、肿瘤标志物和外周血T细胞亚群的影响。方法：选择2017年6月~2018年6月期间我院收治的乳腺癌术后长期门诊随访患者100例,根据双色球法将患者分为对照组（50例）和实验组（50例）,对照组接受西医常规标准化治疗,实验组在此基础上于术后接受乳癌术后方治疗,治疗1年后对比两组疗效、生活质量、肿瘤标志物、外周血T细胞亚群和3年无病生存率。结果：实验组的临床总有效率为84.00%（42/50）,效果优于对照组的56.00%（28/50）,组间比较有统计学差异（P<0.05）。治疗后,实验组症状领域评分较对照组低,总体健康状况、功能领域评分高于对照组（P<0.05）。治疗后,实验组血清糖类抗原125（CA125）、癌胚抗原（CEA）、恶性肿瘤特异性生长因子（TSGF）水平低于对照组（P<0.05）。与对照组比较,治疗后实验组CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺较高,CD8⁺较低（P<0.05）。实验组的3年无病生存率高于对照组（P<0.05）。结论：乳腺癌术后患者在西医常规标准化治疗基础上添加乳癌术后方,效果较好,可有效控制癌症,提高机体免疫功能,促进生活质量改善,提高3年无病生存率。     

灵景方治疗冠心病PCI术后焦虑状态（心神失养证）的临床疗效观察

摘要 目的：研究中药"灵景方"对冠心病PCI术后焦虑状态（心神失养证）患者的疗效。方法：选取2022年4月至2023年3月期间，上海中医药大学附属曙光医院心血管科的患者者共64例，分为中药治疗组及对照组各32例。对照组予常规西药治疗，中药治疗组在对照组基础上加用中药"灵景方"治疗，疗程2个月，运用汉密尔顿焦虑量表（HAMA）、躯体化症状自评量表（SSS）、中医证候积分等评估治疗前后两组患者的焦虑程度、躯体化症状程度以及中医临床证候的缓解程度，并分析患者治疗前后血清hs-CRP水平，以评估炎症反应程度，进而评价患者远期预后。结果：治疗前，两组患者在一般资料、HAMA评分、SSS评分、中医证候积分、血清hs-CRP等方面均无差异。治疗后HAMA评分的下降在中药治疗组内有差异（P＜0.05），而对照组组内无差异（P＞0.05），治疗后中药治疗组评分低于对照组（P＜0.05）。治疗后两组中医证候积分均有下降（P＜0.05），中药治疗组评分较对照组低（P＜0.05）。中药治疗组的总有效率为72.41%，对照组的总有效率为56.67%，中药治疗组的有效率高于对照组（P＜0.05）。两组患者SSS评分在治疗后均有下降，且中药治疗组评分下降更多（P＜0.01）。两组患者治疗后血清hs-CRP下降，中药治疗组低于对照组（P＜0.05）。结论：灵景方可明显减轻冠心病PCI术后（心神失养型）患者的焦虑情绪、中医临床临床症候及躯体化症状，提高生活质量，降低炎症反应，对冠心病的远期预后可起到积极作用。     

四种口腔修复材料对细胞的毒性分析

目的:研究纯钛、钛合金、钴铬合金和镍铬合金四种非贵金属口腔修复材料对L-929成纤维细胞的毒性作用。方法:应用口腔修复材料制备材料浸提液处理培养L-929细胞,采用AnnexinV-FITC试剂盒比较细胞凋亡水平改变,采用Western blot检测细胞凋亡相关基因的表达。结果:纯钛与钛合金诱导L-929细胞凋亡的水平与对照组没有统计学差异(P>0.05);钴铬合金和镍铬合金材料浸提液可引起L-929细胞凋亡增加(P<0.05)。结论:纯钛与钛合金材料对口腔黏膜细胞的毒性作用相较钴铬合金和镍铬合金材料低,更具安全性。     

经腹腔镜实施结直肠癌根治术对高龄患者胃肠功能的影响

目的:探讨结直肠癌高龄患者经腹腔镜实施结直肠癌根治术对胃肠功能产生的影响。方法:选取92例接受结直肠癌根治手术的结直肠癌患者,将其随机数字表法随机分为试验组和对照组两组,其中对照组患者均采用开腹手术进行治疗,而试验组患者则采取腹腔镜下结直肠癌根治手术。观察比较两组患者的术中情况和术后的胃肠功能。结果:两组患者之间的淋巴结清扫数目和标本切除长度均无明显差异(均P0.05),试验组患者的术中出血量以及手术时间均低于对照组患者(t=10.394,P0.05;t=6.983,P0.05)。胃泌素和胃动素水平和患者术后的肛门排气时间以及腹胀持续时间呈显著的负相关关系;试验组患者的术后肛门排气时间和腹胀持续时间均低于对照组患者,并且其胃泌素和胃动素含量均明显高于对照组患者(均P0.05)。结论:腹腔镜下结直肠癌根治手术较开腹手术具有创伤小的优势,并且对于高龄结直肠癌患者术后的胃肠功能具有较好的恢复效果。